技術(shù)文章
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細(xì)胞端粒酶活性分析端粒酶活性分析簡介端粒是真核細(xì)胞染色體末端的一段特殊序列,由上千個(gè)6堿基重復(fù)序列(TTAGGG)組成。在體細(xì)胞中,隨著細(xì)胞的分裂,端粒長度會(huì)變短。端粒酶是基本的核蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶,在細(xì)胞染色體復(fù)制過程中,能夠以自身RNA為模板,在染色體3’末端合成重復(fù)序列,維持端粒的長度。端粒酶的活性端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制,但是在一些“不死細(xì)胞”如腫瘤細(xì)胞、生殖細(xì)胞中則具有很高的活性,補(bǔ)償DNA復(fù)制導(dǎo)致的端??s短從而維持端粒長度的穩(wěn)定。因此可以假設(shè)端粒長度可能起到“...
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細(xì)胞凋亡簡介細(xì)胞凋亡分為病理性凋亡和生理性凋亡兩種,生理性凋亡由遺傳控制,受既定程序(或基因)調(diào)控,屬于程序性的細(xì)胞死亡;病理性凋亡是非遺傳控制的細(xì)胞的意外壞死,區(qū)別于細(xì)胞壞死。流式細(xì)胞檢測原理細(xì)胞凋亡時(shí)在細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子水平上發(fā)生特征性改變。由于凋亡細(xì)胞核的改變,熒光染料對凋亡細(xì)胞的DNA可染性發(fā)生改變,主要是DNA可染性的降低。凋亡細(xì)胞形態(tài)的改變影響光的散射性,在流式細(xì)胞儀中,散射光有兩種:前散射光和側(cè)散射光,前散射光與細(xì)胞的大小有關(guān),側(cè)散射光與細(xì)胞內(nèi)顆粒多少有關(guān),反應(yīng)...
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細(xì)胞STR分型介紹細(xì)胞STR分型(celllineSTRgenotyping)也稱為短串聯(lián)重復(fù)序列(shorttandemrepeat,STR)分型、簡單重復(fù)序列(SSR)分型或微衛(wèi)星標(biāo)記(Microsatellite)分型,是檢測廣泛分布在真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列。一般由2-6bp的核心序列串聯(lián)重復(fù)而成,構(gòu)成了STR基因座的遺傳多態(tài)性。對于一個(gè)特定的個(gè)體,染色體上某個(gè)特定位置的重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)是固定的,而對于不同的個(gè)體重復(fù)次數(shù)可能不同,這就構(gòu)成了人群中STR的多態(tài)性...
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實(shí)驗(yàn)原理流式細(xì)胞檢測工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測得多個(gè)參數(shù),具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),是當(dāng)代的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數(shù)據(jù)的分析系統(tǒng)是流式細(xì)胞儀的主要組成。目前臨床中運(yùn)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行外周血細(xì)胞、骨髓細(xì)胞以及腫瘤細(xì)胞等的檢測是臨床檢測的重要組成部分。流式細(xì)胞儀組成流失細(xì)胞儀三部分構(gòu)成1.液流系統(tǒng),包括流動(dòng)室和液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)2.包括...
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熒光定量PCR簡介實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Realtimequantitativepolymerasechainreaction,RT-qPCR)是在PCR擴(kuò)增過程中,通過探針或者染料的熒光信號變化對PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測的技術(shù)。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)期,模板的Ct值和起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,所以能夠定量檢測核酸。由于Real-timeqPCR具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),而被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、疾病研究、腫瘤的診斷等方面,成為分子生物學(xué)研...
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